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    易科泰植物表型分析技術(shù)快訊 ——多光譜熒光成像系統(tǒng)研究植物脅迫響應(yīng)

    發(fā)布時間: 2020-03-23  點擊次數(shù): 2383次

    FluorCam多光譜熒光成像系統(tǒng)是FluorCam葉綠素熒光成像技術(shù)的高級擴展產(chǎn)品,其高度集成,功能強大,應(yīng)用廣泛,利用系統(tǒng)中的葉綠素熒光成像、多光譜熒光成像、紅外熱成像技術(shù)及RGB成像,可對植物進行全面、非接觸的監(jiān)測,高靈敏度反映光合效率、次級代謝、脅迫生理與抗性、形態(tài)結(jié)構(gòu)等變化。

    ü葉綠素熒光成像分析:植物光合效率、熒光淬滅熱耗散、光響應(yīng)曲線、植物脅迫與抗性等生理功能測量檢測。測量參數(shù)包括Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, QY, QY_Ln, PAR,Rfd等。

    ü多光譜熒光成像分析:UV紫外光對植物葉片激發(fā),可以產(chǎn)生具有4個特征性波峰的熒光光譜,包括表皮及葉肉細胞壁和葉脈發(fā)出的BGF(F440、F520)與葉綠素熒光Chl-F(F690、F740)。用來靈敏、特異性地反映多酚與黃酮類等次級代謝產(chǎn)物動態(tài)變化、葉綠素動態(tài)變化、植物衰老、植物病蟲害脅迫及非生物脅迫等。

    ü紅外熱成像技術(shù):監(jiān)測溫度變化,分析植物氣孔導(dǎo)度、蒸騰作用變化等。

    üRGB成像分析:形態(tài)結(jié)構(gòu)分析

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    多光譜熒光成像系統(tǒng)

    案例1:

    植物具有復(fù)雜的干旱脅迫響應(yīng)過程,應(yīng)對機制多樣。傳統(tǒng)的表型分析方法耗時、耗力且易受主觀影響。通過整合了葉綠素熒光成像的多光譜熒光成像系統(tǒng)進行早期無損檢測,開展表型分析,獲取與光合作用有關(guān)的形態(tài)學、生理學和病理學特征信息,是一種探究植物抗旱反應(yīng)及機理、促進抗旱育種的新手段。浙江大學的這項研究即利用葉綠素熒光和多色熒光成像技術(shù),結(jié)合形態(tài)學、氣孔導(dǎo)度,綜合分析擬南芥野生型pMAQ2(WT)及其突變體increase 1osca1)的干旱脅迫響應(yīng)。

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    RGB成像及多光譜熒光成像

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    葉綠素熒光成像及非光化學熒光淬滅曲線

    參考文獻:Jieni Y , Dawei S , Haiyan C , et al. Phenotyping of Arabidopsis Drought Stress Response Using Kinetic Chlorophyll Fluorescence and Multicolor Fluorescence Imaging[J]. Frontiers in Plant Science, 2018, 9:603-.

    案例2:

    由真菌Rosellinia necatrix引起的白根腐病,是影響鱷梨作物的主要的土壤傳播疾病之一。白根腐病會引起植物根系腐爛、葉片發(fā)黃枯萎,甚至導(dǎo)致植株在出現(xiàn)第1個葉面癥狀幾周后死亡。病害的早期檢測與防治至關(guān)重要。本案例中,對感染Rosellinia necatrix后的植株進行多光譜熒光成像、葉綠素熒光成像、紅外熱成像分別對次級代謝、光合參數(shù)、葉片溫度進行檢測,對比葉片代謝研究,結(jié)果表明,結(jié)合葉綠素熒光成像、多光譜熒光成像與紅外熱成像的方法,是一種診斷病菌侵染與病害發(fā)生的有效手段,且能在癥狀發(fā)生前,早期篩選潛在的受感染植物。

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    鱷梨苗感染不同天數(shù)后外觀變化(R為感染組,C為對照組)

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    多光譜熒光成像(a.紫外激發(fā)下的藍色熒光F440;b.F440定量分析;

    c.紫外激發(fā)下的綠色熒光;d.F520定量分析)

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    參考文獻:Espen, Granum, María, et al. Metabolic responses of avocado plants to stress induced by Rosellinia necatrix analysed by fluorescence and thermal imaging[J]. European Journal of Plant Pathology, 2015.

    案例3:

    Dickeya dadantii是一種導(dǎo)致植物發(fā)生軟腐病的植物病原體,較低劑量的該病菌入侵可引發(fā)植物的防御反應(yīng),從而抑制病菌生長及浸軟植物組織,甚至可以*。但大劑量接種則可能克服植物的防御能力從而誘導(dǎo)植物組織浸軟和死亡。病菌入侵引發(fā)的植物響應(yīng)包括:光系統(tǒng)Ⅱ光合速率的抑制;與植物防御機制有關(guān)的非光化學熒光淬滅的激活;酚類化合物等次級代謝物的積累;與脅迫響應(yīng)相關(guān)激素(如脫落酸、茉莉酸、水楊酸)的積累。而非光化學熒光淬滅、ABA等激素積累會進一步影響氣孔開合與蒸騰作用,從而影響葉片溫度。

    本研究中,將不同濃度的Dickeya dadantii懸浮液(C為對照,LD 為104 cfu/10 mM MgCl2,HD為106 cfu/10 mM MgCl2)注射入煙草健康葉片背部,通過葉綠素熒光成像、多光譜熒光成像、紅外熱成像技術(shù)監(jiān)測病菌侵染1-6天后,葉片光合作用、次級代謝動態(tài)變化,葉片溫度等生理狀態(tài)的動態(tài)變化。結(jié)合細菌濃度監(jiān)測、代謝物定量分析等,綜合研究病菌侵染后葉片的防御反應(yīng)。

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    葉片光合與代謝動態(tài)變化(A.葉片RGB圖像;B.大光量子效率Fv/Fm;C.非光化學熒光淬滅NPQ;D.光系統(tǒng)Ⅱ光量子效率;E.紫外激發(fā)下的藍色熒光F440;F.紫外激發(fā)下的綠色熒光)

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    葉片溫度動態(tài)變化

    參考文獻:Pérez-Bueno María L, Espen G , Pineda Mónica, et al. Temporal and Spatial Resolution of Activated Plant Defense Responses in Leaves of Nicotiana benthamiana Infected with Dickeya dadantii[J]. Frontiers in Plant Science, 2016, 6.

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